JJG861-94 酶标分析仪检定规程修改之我见

全军医用光学计量总站 李祖江

摘要：本文提出了对JG861-94 酶标分析仪检定规程的修改意见。如果本修改意见可以被采纳，一是可将原规程中完成一次计量检定所需要的32次测试简化为14次，缩短一半以上检定时间。二是可将配齐一套酶标分析仪检定装置的费用由五万多元降到不足一万元。这不光对将来建立酶标分析仪的标配置有较大的参考作用，同时也具有较大的社会及经济效益。

关键词：酶标分析仪，检定规程，修改意见

中国分类号：TH744           文献标识码：A

JG861-94 酶标分析仪检定规程已经施行8年有余，根据惯例，该规程已经到了修改的时候了。本文对该规程的修改提出几条个人看法，希望能对该规程的更加合理及完善尽点微薄之力。

      一、对“概述”部分的修改意见

 原规程A、B两类仪器的指标中，除了测试速度之外，其他各种要求都一样。而测试速度对于酶分析仪来说，是一项很次要的指标。故建议将A、B类仪器合为A类。这样做可减少后面叙述时的麻烦。

          二、对“技术要求”部分的修改意见

 (一)、规程中的各项技术要求是分开一项项写的，看起来比较麻烦。如能改成表一的形式，可使读者看起来一目了然。

 

          表一 酶标仪的主要技术要求表

 

        （二）、第8条即“测试速度”后面什么文字也没有，这不完整。应加上“仪器的测试速度应符合表6的要求”一句话。

        三、对“检定条件”部分的修改意见

        从第11.1条即标准干涉滤光片看，原规程要求各检定单位配备峰值波长为405±2nm、450±2nm、492±2nm、540±2nm及620±2nm五块标准干涉滤光片，但在检定方法一条中只用到了405、450及620nm三块。也就是说，实际上只使用三块干涉滤光片就够了，用不着配备五块。这是其一。

        其二，干涉滤光片是用来检定C类酶标仪的波长的。而C类酶标仪本质上就是一台光路稍微有点儿变化的可见分光光度计。从节省经费出发，建议将此条改成使用检定可见分光光度计的干涉滤光片——即使用可见分光光度计检定规程中规定的45^#、55^#、65^#三块干涉滤光片来检定酶标仪。这样一来，国内大多数建立了分光光度计标准的计量检定单位在建标时就可以不必再增添新的波长检定标准。即利用原来检定可见分光光度计的标准干涉滤光片就可满足要求了。

        从技术指标角度来看，这样的设想也完全是可行的。在可见分光光度计的检定规程中，检定波长所配的滤光片均为１级干涉滤光片。这样的滤光片可用来检定波长准确度为±3nm 的光栅型3类分光光度计。在酶标仪中，对C类仪器波长准确度的要求为±4.0nm。可见，本建议在技术指标上也是满足要求而有余的。

        四、对检定项目和方法部分的修改意见（主要针对目前应用最多的A、B类仪器）

      （一）、建议将原规程中17、18、19三条合并为17条，名字叫做“吸光度、吸光度重复性、线性误差的检定方法：该条可修改成下文：

    “将0.5A和1.0A两块标准滤光片同时平放到专用测试板上。以空气为参比，在405nm和620nm波长下各测量三次。在492nm波长下先连续测量五次；然后，将两块标准滤光片叠加后再测量三次（具体步骤见仪器说明书）。

        17 .1　取405、492和620nm 三种波长下前三次测量的平均值与其吸光度标准值之差作被检仪器的吸光度准确度。”（吸光度准确度公式不变）。

        17.3　将0.5A和1A的中性滤光片在492nm时前三次测量平均值分别定为A₁和A₂ 。将0.5A和1A两块中性滤光片叠加后三次测量平均值定为A_{1. 2} 。线性误差a_A按下式计算。”（公式仍用原公式）。

 这样做和原规程的区别主要有三点：

第一点是将原规程中分别测量0.5A和1.0A两块中性滤光片的值改成了同时测量，这首先节省了一半的测量时间。

第二点是用492nm中性滤光片（固体标准物质）代替重铬酸钾溶液做吸光度重复性的测定。改用固体标准物质测量重复性有五大好处：一是省去配制重铬酸钾溶液的时间；二是可节省配制溶液所需要的干燥箱、天平和移液器等设备；三是节省了使用重铬酸钾溶液本身及双蒸水的费用；四是便于携带和保管，五是使检定操作方便省时，提高了检定效率。

这样考虑的依据是：首先是对酶标分析仪来说，重复性考查的对象一是仪器的光源（含光源电路），二是仪器的整个信号通路，三是仪器的显示器。而这三者的稳定与否均和所测的对象是固体还是液体无关。其次是，类似的仪器（无论是单光束紫外分光光度计还是在可见分光光度计）均是采用测量固体标准物质来作重复性检定的。

第三点是用492nm代替了540nm来所做的线性误差测定。其理由之一是，许多酶标分析仪（如Σ960、DV990BV以及Wellscan MK3 型等型号）根本就不配备540nm的滤光片，无法在540nm波长下测量线性误差。而所有的酶标仪几乎没有不配备490（492）nm滤光片的。理由之二是，从工作原理上看，造成线性误差主要原因是被测液因浓度范围过大而偏离了朗伯—比尔定律，即吸光度A与浓度C不成线性比例。减少线性误差的方法是在仪器的电路部分或数据处理部分加以校（或修）正，使其基本上保持在线性范围之内。由此可知，线性误差无论是其产生原因还是校正方法均与测试波长不相关。改在492nm下测，可以明显节省时间，提高工作效率。

 综上所述，若将17、18、19三条合为一条，并采用上述方法测试，可将原先完成上述三条检定所需要的32次测试（17条测18次，18条5次，19条9次）简化为14次。缩短一半以上检定时间。

        （二）、建议取消16.2条（即对酶标仪的滤光片检定）这项指标

        这是因为16.2条不论实际操作还是执行起来难度均很大。先从实际操作方面来讲，检定干涉滤光片的分光光度计通常都比较笨重，尤其是自动扫描式分光光度计，若要将其带到检测现场去是十分困难的，有的几乎是不可能。如不将分光光度计带到现场，势必要先将干涉滤光片拆下来，拿回计量单位计量。计量完后再将滤光片送回并安装上，才能进行下一步计量。这对离计量单位路途比较近的用户来说，尚可操作，对路途远的用户来说，执行起来将十分困难。

再从执行角度来说，且不论检定滤光片时要打开被检仪器将滤光片拆下来方便不方便，即便是检出了透射比变低的滤光片也不好处理。比如规程规定，对A、B类仪器，规定其峰值透射比应≥35%，而实际情况是，有的仪器、甚至是新购的进口仪器都达不到这个数值，如有的只有20%多些，有的可能还达不到20%，但仪器使用起来却是正常的。在这种情况下，如不让用户使用，用户根本不会接受。用户会问：“我的仪器按照说明书能通过自检，测量出来的数据又是正常的，为什么不能使用？”计量人员无法给人满意和信服的回答。如若固执已见，很可能引起误解，搞僵相互之间的关系。

有介于此，笔者认为，对于干涉滤光片，可以不予检定。只要仪器最主要的指标（稳定性、吸光度及重复性等）在合格范围之内，就应判为合格。

以上各条建议，如能被采纳，一是可以大大减少配齐一套酶标分析仪检定装置的费用（如可省去一台中、高档分光光度计、五块干涉滤光片、一台分析天平，一台烘箱以及加移液器、搅拌器等设备），将配齐一套酶标分析仪的整套检定装置的费用由五万元以上降到数千元。这对准备建立此项标准的单位来说不能不说是一条福音。二是可以大大节省检定时间（节省时间一半以上），有较大的社会及经济效益。希望引进有关管理及计量专家的重视。

 以上执笔者的一孔之见。欢迎有关同行对本文的不当之处提出宝贵意见。

       

参考文献：JJG861--94 酶标分析仪检定规程

             JJG178--96可见分光光度计检定规程

             JJG375--96单光束紫外--可见分光光度计检定规程

           上海市医学化验所. 临床生化检验(下册). 上海：科学技术出版社1985